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T4 DNA 连接酶和T4 RNA 连接酶

2025-05-15

M-MLV Reverse Transcriptase, RNase HMinus, Point Mutant
说明:Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase,RNase H Minus, (M-MLV RT [H–]), Point Mutant, 点突变型 M-MLV逆转录酶,RNase H 缺失) 是 RNA 依赖的 DNA 聚合酶,可用于长mRNA (>5kb) 为模板的 cDNA 合成。RNase H 活性的缺失有利于其应用,因为在长孵育时间的时候,RNase H 会开始降解模板。虽然许多研究者已经成功使用 M-MLV RT(H+) 进行了一些 cDNA 制备应用及分析,但是缺失了 RNase H 活性的逆转录酶为长 cDNA 的制备及包含高比例全长 cDNA 的文库制备提供了更好的选择。
特点:
• 无 RNase H 活性:为以长 RNA 为模板制备全长 cDNA 提供了优化条件。
• 温度稳定性:点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题。
• 聚合酶活性增强:M-MLV RT [H-], Point Mutant (Cat.# M3681)与缺失突变得到的 M-MLV RT(Cat.# M5301) 相比,具有更高的cDNA 产率。
• 提供 5× 反应缓冲液:250mM Tris-HCl (pH 8.3,25℃ ),375mM KCl,15mM MgCl2,50mM DTT。
• 广泛的工作范围:提高了逆转录的性能,使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。储存条件:储存于 -20℃。

T4 DNA Ligase
说明:T4 DNA Ligase(T4 DNA 连接酶) 催化粘性末端或平末端两条DNA 链的相邻核苷酸的 5'- 磷酸基和 3'-OH 的连接。该酶也可催化RNA 与双链 DNA 或 RNA 的连接,但不能使单链核酸相连。
特点:
• 提供高浓度产品:Cat.# M1794 包含 500 单位 10–20u/μl 的 T4DNA Ligase。
• 灵活:可用于 5'、3' 或平末端 DNA 插入片段。
• 提供 10× 反应缓冲液:300mM Tris-HCl (pH 7.8,25℃ ),100mM MgCl2,100mM DTT 和 10mM ATP。
• 蓝 / 白克隆验证:Promega 的蓝 / 白克隆检测为用于克隆的酶提供了高水平的质量控制。

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M3681    M-MLV Reverse Transcriptase, RNase HMinus, Point Mutant    2,500U
M3682    M-MLV Reverse Transcriptase, RNase HMinus, Point Mutant    10,000U
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C1263    T4 DNA Ligase Buffer Pack    1.5ml(3*500ul)

LigaFast™ Rapid DNA Ligation System
说明:LigaFast™ Rapid DNA Ligation System(LigaFast™ DNA 快速连接系统) 可在 5 分钟内高效地将粘性末端 DNA 插入片段与质粒载体连接(平末端插入只需 15 分钟)。快速连接是基于 T4 DNA 连接酶与独特的 2X Rapid Ligation Buffer(2X 快速连接缓冲液 ) 结合而实现的。LigaFast™ System 可以免除连接 DNA 转化前的进一步纯化。
独特的 2X Rapid Ligation Buffer(2X 快速连接缓冲液 ) 无需在使用前加入 ATP 或 Mg2+。
特点:
• 灵活:可用于 5'、3' 或平末端 DNA 的插入。
• 快速:在室温下,粘性末端连接需要 5 分钟,平末端连接需要15分钟。
• 方便:在热休克转化 E. coli. 前不需要进行被连接 DNA 的纯化,连接反应可在室温下完成。
• 即用:不需要在使用前对缓冲液进行调整。
• 高效:使用 LigaFast™ System 连接的效果与标准的过夜连接效果相同。
• 蓝 / 白克隆验证:Promega 的蓝 / 白克隆检测为用于克隆的酶提供了高水平的质量控制。
储存条件:储存于 -20℃。

T4 RNA Ligase
说明:T4 RNA Ligase(T4 RNA 连接酶) 催化依赖于 ATP 的连接反应,将单链 RNA 或 DNA 与 5'- 磷酸末端的单链 RNA 或 DNA 相连。该酶从重组 E. coli CA4 (RNase I- 缺失 ) 中纯化而来,分子量为43.5kDa。T4 RNA Ligase 也可催化在单链 RNA 分子上添加 [5'-32P]核苷酸和 3', 5'- 双磷酸的反应。
特点:
• 高温失活:T4 RNA Ligase 在 65℃加热 15 分钟失活。
• 提供 10× 反应缓冲液:500mM Tris-HCl (pH 7.8,25℃ ),100mM MgCl2,50mM DTT,10mM ATP 。
储存条件:储存于 -20℃。

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